XI Curso de Verão em Bioquímica e Biologia Molecular

Apresentação dos laboratórios : curso de verão 2015

Laboratório 1 
Laboratório de Divisão Celular Bacteriana
Resumo: A divisão celular é o processo através do qual uma célula, chamada célula-mãe, se divide em duas células filhas, com toda a informação genética relativa à espécie. O objetivo principal do nosso projeto é determinar qual é o papel das proteínas MinC-MinD e do composto MB17 na divisão celular de Bacillus subtilis e Trypanosoma cruzi respectivamente. Para isso serão realizados experimentos de Microscopia de fluorescência para determinar a localização das proteínas relatadas e as diferenças morfológicas desencadeadas pela ação do composto.
Técnicas Utilizadas: cultura de bactérias e microscopia de fluorescência.

Laboratório 2 
Laboratório de Processos Redox em Inflamação 
Resumo: O objetivo do nosso projeto é apresentar as técnicas de cultura de células e seus usos em bioquímica e biologia molecular, e utilizar essas abordagem para investigar os efeitos do burst oxidativo de neutrófilos sobre proteínas desse tipo celular.

Técnicas utilizadas: cultura de células de mamíferos e tripanosomatideos, contagem e ensaio de sobrevivência celular com azul de tripano, ensaios colorimétricos para produção de anion superóxido, acido hipocloroso e oxidação de proteínas.

Laboratório 3 
Laboratório de Mecanismos Moleculares de Citoproteção 
Resumo: A diabetes mellitus é uma doença metabólica caracterizada por hiperglicemia resultante da deficiência na secreção de insulina, da ação desta, ou ambas. O transplante de ilhotas pancreáticas é uma terapia promissora para o tratamento da diabetes mellitus tipo 1 (DM1), mas a rejeição dos enxertos faz com que seja necessário o desenvolvimento de mecanismos moleculares que protejam essas células. Resultados prévios do nosso laboratório mostraram que a Prolactina Recombinante Humana (rhPRL) inibe a apoptose em células beta pancreáticas. O objetivo do nosso experimento é verificar se a prolactina protege as células beta pancreáticas contra a morte induzida por estresse do retículo endoplasmático.

Técnicas Utilizadas: cultura de células e microscopia de fluorescência.

Laboratório 4 
Laboratório de Biologia Molecular do Câncer
Resumo: O câncer de pulmão induzido por mutações em KRAS é uma doença altamente prevalente e para a qual ainda não existem tratamentos eficazes capazes de inibir diretamente a atividade de KRAS. Por meio de uma abordagem indireta de inibição desta oncoproteína, o objetivo deste experimento é caracterizar a quinase Aurora A como um importante efetor da atividade oncogênica de KRAS no câncer de pulmão, de modo a prover fundamento científico para o desenvolvimento de terapias alvo-dirigidas que melhorem a sobrevida de pacientes portadores de mutações em KRAS.
Técnicas Utilizadas: Ensaio de expressão proteíca por western blot; e ensaio de viabilidade por redução de MTT

Laboratório 5 
Laboratório de Enzimologia
Resumo: O objetivo geral é investigar a existência de dois subdomínios , as metades N- e C-terminal, na estrutura de barril das beta-glicosidases GH1 de Thermatoga marítima e bglB de Paenebacillus polymyxa através da análise da inativação térmica destas enzimas
Técnicas utilizadas: Purificação de proteínas, Lise bacteriana, Dosagem de proteína, Cinética enzimática, Inativação térmica, Eletroforese

Laboratório 6 
Laboratório de Genética Mitocondrial
Resumo: Espécies reativas de oxigênio estão relacionadas aos mecanismos de morte celular em várias doenças neurodegenerativas, como na doença de Alzheimer, Parkinson e Huntington. O objetivo deste trabalho é avaliar os danos ao DNA e o tipo de morte celular induzidos em células neuronais sob estresse oxidativo
Técnicas Utilizadas: SDS-PAGE, western blotting, extração e resolução de DNA genômico em gel de agarose.

BIBLIOGRAFIA 

Bioquímica Básica - A. Marzzoco & B.B. Torres - Ed. Guanabara Koogan – 2a ed. - 1999 
Bioquímica - L. Stryer - Ed. Guanabara Koogan - 4a ed. - 1996 
Fundamentos de Bioquímica – D. Voet, J. G. Voet & C. W. Pratt – Artmed Editora- 2000 
Biochemistry - D. Voet & J.G. Voet - John Wiley & Sons - 3rd ed 2004 
Biochemistry – J. M. Berg, J.L. Tymoczko & L. Stryer - W.H.Freeman and Company – 5th ed. - 2002 
Lehninger Principles of Biochemistry - D.L. Nelson & M.M. Cox – Worth Publishers, 3rd ed. New York – 2000 
Biochemistry - C. K. Mathews & K.E. van Holde – The Benjamin/Cummings Publishing Company – 1996 
Principles of Biochemistry - H.R. Horton, L.A. Moran, R.S. Ochs, J.D. Rawn & K.G. Scrimgeour Prentice Hall - 1993


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